2019-07-12 10:29:52 浏览数:0
1 常规超薄切片技术
一般的透射电镜电子束的穿透能力较弱,大多数标本无法直接在电镜下观察,必须切成厚度为50~70nm的超薄片,这种制作超薄片的技术称为超薄切片技术。在透射电镜的生物医学样品制备方法中,超薄切片技术是最基本最常用的制备技术,其他一些样品制备技术,如细胞化学技术,免疫电镜技术及电镜放射自显影技术都离不开超薄切片的制作。利用透射电镜观察超薄切片,可以了解细胞的精细结构。
2 负染色技术
负染色技术也叫阴性反差染色,它是由Hall等首先采用的一种染色技术,与超薄切片法相比,该技术具有分辨率高、简单易行和快速方便等优点。因此在生物学研究中被广泛应用。这种方法可以显示大分子、细菌、病毒、细胞器及蛋白质晶体等样品的形状、大小和表面结构特征。尤其是在病毒学领域,有关病毒的分类及病毒亚单位结构的显示、病毒与抗体的相互作用等研究中,负染色更是不可缺少的实验技术。
3 金属投影与复型技术
金属投影技术是利用真空喷镀仪对样品进行投影的一种技术,Williams首先用这种技术用于增加电镜图象的反差。该技术还可用来测量颗粒及大分子的大小。复型技术主要用于样品表面结构的研究。某些坚硬的材料,如牙齿、骨骼、金属等,它们是不透明的,并且很难制成超薄切片,对于这些材料可用一种电子透明的薄膜将其表面结构复制下来,即成复型。通过对该复型样品的观察,就可以了解原有样品的天然断面或人工断面的结构特征。
4 冷冻切片技术和冷冻蚀刻复型技术
冷冻切片技术是使样品迅速冷却,然后用冷冻切片机进行冷冻切片,它省去了普通超薄切片中繁杂的化学固定与包埋操作。该技术在细胞化学研究中有着特殊用途。冷冻蚀刻复型技术是一种冷冻断裂与复型相结合的样品制备技术,该技术在生物学中的广泛应用不仅验证了超薄切片所展示的细胞超微结构,而且还揭示了某些前所未见的新结构,尤其是在显示生物膜的结构方面,该技术有着独特作用。
5 电镜细胞化学技术
电镜细胞化学技术又称超微结构细胞化学技术,它是从光镜组织化学的基础上发展起来的一种超微结构技术,它的任务是研究细胞内各种成分在超微结构水平上的分布情况以及这些成分在细胞活动过程中的动态变化,以阐明细胞的化学和生化功能。其中最主要的是蛋白质(尤其是酶的细胞内定位),其次是核酸、脂肪、碳水化合物及无机离子的定位。该技术有力的促进了形态学和生物化学的结合,使生命科学的研究进入了新的水平。
6 免疫电镜技术
也称为电镜免疫组织(或细胞)化学技术。免疫电镜技术是通过特殊的标记方法使抗体与电子致密的标记物相结合,然后利用电镜在超微结构水平上鉴定抗原-抗体的结合反应。在免疫学领域中,这是一种非常有用的实验技术。
7 电镜放射自显影技术
电镜放射自显影技术是一种利用放射性同位素作为标记物对细胞化学物质进行超显微结构的定位、定性或定量研究的技术。这种技术不仅用于对重要的代谢物质进行定位、定性或定量,而且还用于显示抗原-抗体的结合,激素或药物与受体的结合,显示病毒的感染与复制部位等。因此这是一种非常有用的现代生物学技术。
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